Kromogeenne tehnika on üks kolmest tehnikast, mis sisaldavad ka geel-hüübetehnikat ja turbidimeetrilist tehnikat, et tuvastada või kvantifitseerida gramnegatiivsetest bakteritest pärinevaid endotoksiine, kasutades hobuserauakrabi (Limulus polyphemus või Tachypleus tridentatus) sinisest verest ekstraheeritud amööbotsüütide lüsaati.Seda võib klassifitseerida lõpp-punkti kromogeenseks testiks või kineetiliseks-kromogeenseks testiks, mis põhineb konkreetsel kasutatud analüüsi põhimõttel.
Reaktsiooni põhimõte on järgmine: amebotsüüdi lüsaat sisaldab seriinproteaasi ensüümide (proensüümide) kaskaadi, mida võivad aktiveerida bakteriaalsed endotoksiinid.Endotoksiinid aktiveerivad proensüümid, et toota aktiveeritud ensüüme (nimetatakse koagulaasiks), viimane katalüüsib värvitu substraadi lõhenemist, vabastades kollase värvusega produkti pNA.Vabanenud pNA-d saab mõõta fotomeetriliselt 405 nm juures.Ja neeldumine on positiivses korrelatsioonis endotoksiini kontsentratsiooniga, siis saab endotoksiini kontsentratsiooni vastavalt kvantifitseerida.
Postitusaeg: 29. september 2019
